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ELISA試劑盒實驗中常見問題和解決方法

發布時間:2020-08-18   點擊次數:553次
   elisa試劑盒回收率是反應待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出標準數據為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關系,說明方法的準確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯標準樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為2.98mg/L,則認為回收率為99%。
  接下來小編為您一起了解下ELISA試劑盒實驗中常見原因如下:
  a)可能原因:加樣本及試劑量不準;孔間不一致;
  解決方法:校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時要緊密。
  重復某一樣品時,加樣時間盡可能與在次接近;
  重復測定標本,操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;樣品稀釋前應充分混勻。
  b)可能原因:加樣過快,孔間發生污染;
  解決方法:重復測定標本,操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;加樣不要過快。
  c)可能原因:加錯樣本;
  解決方法:檢查記錄和試劑,是否加錯樣本。
  d)可能原因:加樣本及試劑時,加在孔壁上部非包被區;
  解決方法:加樣槍頭不要貼壁。
  e)可能原因:不同批號試劑盒中組分混用;
  解決方法:不同批號試劑盒中組分不可混用。
  f)可能原因:溫育時間、洗板、顯色時間不一致;
  解決方法:檢查時間是否一致。
  g)可能原因:孔內污染雜物;
  解決方法:離心樣品,排除雜物。
  h)可能原因:試劑/樣品沒有混勻;
  解決方法:充分混勻樣品和試劑。
  i)可能原因:血清標本未完全凝固即加入,反應孔內出現纖維蛋白凝固或殘留血細胞,易出現假陽性反應等。
  解決方法:待血清標本完全凝固后做試驗。
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